Головна » Статті » Cтатті » Нове в трансфузіології |
Современный подход к выполнению всего спектра иммуногематологических исследований
Гелевою технологию в микропробирках предложил Y. Lapierre в 1989 г. Метод основан на агглютинации эритроцитов в агаровом геле «сефадекс», помещенном в микропробирки. Забуференный декстрановый гель «Sephadex™ G 100 superfine» может быть как нейтральным, так и содержащим специфические антисыворотки или антиглобулиновый реагент на гелевом матриксе. На гель наносятся эритроциты или смесь эритроцитов и сыворотки. Клетки всегда вносятся перед сыворотками (в отличие от стандартных серологических методик) с тем, чтобы тестируемые сыворотки не контактировали с гелем, что особенно важно при проведении антиглобулинового теста. После инкубации следует центрифугирование в строго определенном режиме. Если условия центрифугирования не выполняются (центрифугирование недостаточно длительное или слишком мягкое), могут иметь место ложноположительные результаты. Ложноотрица-тельные результаты' также могут иметь место при нарушении условий центрифугирования (при форсировании). Использование автоматической ID-центрифуги устраняет эти проблемы. Для проведения тестов обычно используются три вида геля: 1) нейтральный, не содержащий специфических антител (применяется для поиска и идентификации антител солевым и ферментным методами, на холодовой стадии пробы на совместимость крови донора и реципиента); 2) специфический, содержащий антитела (моноклональные или поликло-нальные) к антигенам эритроцитов крови человека (применяется для типирования антигенов эритроцитов систем АВО, резус, Kell и т.д.); 3) антиглобулиновый, содержащий антитела (полиспецифические или моноспецифические) к иммуноглобулинам человека и компонентам системы комплемента (применяется для прямого и непрямого антиглобулинового теста, т. е. реакции Кумбса, при поиске и идентификации ауто- и аллоиммунных антител, пробе на совместимость крови донора и реципиента). Исследуемая кровь добавляется в верхнюю часть микропробирок диагностических карт, и при центрифугировании осуществляется разделение агглютинированных и неагглютинированных эритроцитов следующим образом: агглютинированные эритроциты имеют размер, сравнимый с размером части геля, и свободно проходят сквозь них под действием центробежной силы, формируя на дне микропробирки компактный осадок красного цвета - отрицательный результат; агглютинированные эритроциты ввиду больших размеров задерживаются на поверхности геля или в его толще - положительный результат. Фиксированная агглютинация в геле позволяет легко оценивать результат реакции, а наличие контрольной микропробирки в диагностической карте подтверждает достоверность полученных данных. В зависимости от силы реакции агглютинации в гелевой среде принята следующая оценка полученных результатов: - сильноположительный (++++) - образовавшиеся агглютинаты эритроцитов задержались на поверхности геля; - положительный (+++) - агглютинаты располагаются в верхней трети столбика геля; - слабоположительный (++) - агглютинаты фиксированы в верхних двух третях геля; - очень слабоположительный (+) - агглютинаты располагаются в нижней трети геля; - отрицательный (-) - эритроциты формируют на дне микропробирки компактный осадок.. .
Виды исследований, которые можно выполнить с помощью гелевой технологии • определение групп крови (прямая и двойная реакция) • определение резус-принадлежности • широкое типирование антигенов эритроцитов всех известных систем • скрининг и идентификация аллоантиэритроцитарных антител • диагностика аутосенсибилизации к антигенам эритроцитов • индивидуальный подбор гемокомпонентов для переливания и пробы на совместимость • диагностика посттрансфузионных осложнений и гемолитической болезни новорожденных.
Основные преимущества использования гелевой технологии • Высокая чувствительность и специфичность тестов: в основе лежит использование более чувствительного метода агглютинации и гель-фильтрации, а также использование более чувствительных и специфичных моноклональных антител, что позволяет проводить диагностику слабых вариантов антигенов и антител (включая А2, A3 ...; Du, DVI); единственный метод выявления посттрансфузионных и посттрансплантационных «химер»
• Объективизация, стандартизация и возможность хранения результатов исследований: стандартизация учета результатов; хранение карточек с результатами более 7 дней; возможность фотодокументации результатов (сканирование, фотодокументация с помощью ридера); возможность автоматизации выполнения исследований • Удобство и простота в исследовании, повышение безопасности персонала: отсутствие этапов отмывания эритроцитов; исследование крови, заготовленной на консервантах и стабилизаторах без искажения результатов; сокращение времени на проведение полного иммуногематологического исследования в 2-5 раз; снижение риска заражения персонала инфекциями, передающимися через кровь. | |
Переглядів: 1676 | Коментарі: 1 | | |
Всього коментарів: 0 | |